«Inside the Cycle»: una guía práctica para la carga de ciclos de autoclave con líquidos y residuos

«Inside the Cycle»: una guía práctica para la carga de ciclos de autoclave con líquidos y residuos

Un ciclo puede finalizar a la hora prevista y, aun así, no esterilizar correctamente parte de la carga —por razones físicas opuestas en el caso de un frasco de medio de cultivo y una bolsa de residuos—. A continuación se explica lo que ocurre realmente en el interior de la cámara en cada caso y cómo se debe cargar la carga en función de ello.

Astell ya ha abordado en otras ocasiones por qué los ciclos de líquidos y los ciclos de residuos deben especificarse y abordarse de forma diferente; consulte los artículos «Cómo realizar correctamente los ciclos de líquidos» y «La otra mitad del trabajo» para conocer ese aspecto de la cuestión. La presente guía es el complemento de dichos artículos: no se centra en por qué ambos ciclos son diferentes, sino en lo que ocurre exactamente en el interior de la cámara durante cada uno de ellos, así como en la técnica práctica de carga que determina si un ciclo que parece correcto en la pantalla ha cumplido realmente su función.

Tanto las cargas de líquido como las de desecho pueden completar un ciclo, mostrar el mensaje «completado» y, aun así, haber fallado en parte de la carga —por razones físicas totalmente distintas en cada caso—. Comprender esas razones es lo que distingue una técnica de carga que simplemente funciona de una que funciona de forma fiable.

Primera parte: Ciclos de líquidos y medios

Empiece por los recipientes, no por el autoclave

La uniformidad es el factor más importante en una carga de líquidos, y comienza antes de que los frascos lleguen a la cámara. Los frascos adecuados —los frascos de laboratorio tipo Duran son la opción estándar— deben ser del mismo tamaño y estar llenos con volúmenes similares, por ejemplo, alrededor de 300 ml cada uno. Que el tamaño y el volumen de llenado coincidan significa que cada recipiente se calienta aproximadamente al mismo ritmo.

La razón es una cuestión de física básica: un frasco que sea mucho más grande o esté mucho más lleno que el resto de la carga se quedará rezagado térmicamente. Puede que parezca estar en buen estado al finalizar el ciclo, pero puede estar insuficientemente procesado, aunque el ciclo mostrado parezca haberse completado con normalidad, ya que el punto de control del autoclave estaba tomando como referencia un frasco diferente que se calentaba más rápido.

Deje espacio para que la carga «respire»

Una vez que las botellas se encuentran en la cámara, el espaciado es tan importante como la elección de las mismas. El vapor necesita espacios de aire entre los recipientes para circular y desplazar el aire que está sustituyendo; esa circulación es lo que permite que todas las partes de la carga se calienten de manera uniforme. Las botellas apiladas sin espacio entre ellas, o las que están apretadas contra la pared de la cámara, bloquean esa circulación y pueden dejar zonas más frías dentro de la carga, incluso en un ciclo que, por lo demás, se haya desarrollado correctamente.

  • Deje espacios visibles entre las botellas, no solo entre la carga y la pared de la cámara.
  • Evite apilar las botellas directamente unas encima de otras, a menos que la cesta o la rejilla estén diseñadas específicamente para ello.
  • Mantenga los cuellos de las botellas en posición vertical y los cierres sueltos o ventilados, nunca completamente sellados, para que la presión pueda equilibrarse de forma segura durante el ciclo.

La sonda de carga: su única lectura fiable del producto

Muchos autoclaves controlan las cargas líquidas mediante una sonda de carga —a veces denominada sonda de temporización con detección de carga o sonda LST (consulte la guía de Astell sobre qué es la temporización del proceso con detección de carga para conocer cómo funciona esta función)— que se inserta en un recipiente representativo a través de un orificio en la tapa de la botella. La botella que lleva la sonda se convierte, en la práctica, en la botella de control de toda la carga: su lectura es la que utiliza el autoclave para decidir cuándo ha comenzado realmente la esterilización y durante cuánto tiempo debe continuar. Esto hace que la colocación de la sonda sea una decisión con consecuencias reales, no un paso rutinario que se deba realizar a toda prisa.

Por qué fallan las cargas mixtas

Mezclar tamaños de botellas en una misma carga es una de las formas más habituales en que un ciclo de líquidos falla de forma imperceptible. Si se procesan conjuntamente botellas pequeñas y grandes y la sonda se coloca en una botella pequeña, esta alcanza primero la temperatura de esterilización y el autoclave comienza a cronometrar el tiempo de mantenimiento —mientras que las botellas más grandes aún están poniéndose al día—. Esos volúmenes mayores pueden acabar sin estar suficientemente esterilizados, aunque el ciclo se haya completado según lo previsto.

Si, en cambio, se coloca la sonda en la botella más grande, surge el problema inverso: las botellas más pequeñas, que alcanzaron la temperatura antes, permanecen en condiciones de esterilización durante más tiempo del necesario y se someten a un tratamiento excesivo —un problema especialmente grave para los medios sensibles a la temperatura, que pueden caramelizarse o sufrir alteraciones en el pH debido al exceso de calor—. La solución fiable consiste en mantener las cargas de líquido lo más uniformes posible en cuanto a tamaño y volumen y, cuando la mezcla sea realmente inevitable, colocar la sonda en el elemento de la carga que se caliente más lentamente, nunca en el que lo haga más rápido.

Qué ocurre realmente durante un ciclo de líquidos

Comprender las etapas de un ciclo de líquidos explica por qué los detalles anteriores son tan importantes:

  1. Vaporización libre. El ciclo se inicia a unos 100 °C, expulsando el aire de la cámara y permitiendo que la temperatura de la carga comience a igualarse a la de la cámara.
  2. Presurización y calentamiento. Una vez finalizada la etapa de vapor libre, la válvula se cierra y el autoclave aumenta la presión y la temperatura hasta alcanzar un punto de consigna de esterilización —normalmente 121 °C durante 15 minutos, aunque esto varía según el protocolo y la sensibilidad al calor del medio—.
  3. Sobreexcursión y mantenimiento. Dado que el líquido se calienta más lentamente que la cámara metálica que lo rodea, el controlador puede elevar brevemente la temperatura de la cámara por encima del punto de consigna —hasta aproximadamente 123 °C— para ayudar a que el líquido alcance la temperatura deseada más rápidamente. Una vez que la sonda de la carga confirma que el propio líquido ha alcanzado la temperatura objetivo, el controlador estabiliza la cámara justo por encima del punto de consigna, de modo que la carga se mantenga a 121 °C o por encima de esta temperatura durante todo el tiempo de esterilización.
  4. Enfriamiento. Muchos sistemas se enfrían de forma natural hasta situarse justo por encima de los 100 °C antes de que los ventiladores se activen para facilitar el proceso. No se debe abrir la carga hasta que su propia temperatura —y no solo la de la cámara— haya descendido por debajo de aproximadamente 80 °C. En ese momento, con guantes resistentes al calor y protección facial adecuada, se pueden retirar los frascos de forma segura.

Un enfriamiento más rápido requiere sus propias medidas de seguridad

Las camisas de enfriamiento o los ventiladores internos de la cámara aceleran la etapa final —a menudo la más lenta— de un ciclo de líquidos. Cuando se incorporan estas características, también se requiere un sistema de lastre de aire para gestionar la rápida caída de la presión en la cámara que se produce a medida que la carga se enfría. Sin él, el líquido contenido en recipientes sellados o parcialmente sellados puede hervir y salir burbujeando en las condiciones de presión reducida creadas por el enfriamiento rápido, lo que convierte una característica que ahorra tiempo en un riesgo de derrame. Consulte la guía complementaria de Astell sobre las cinco formas en que un autoclave enfría una carga para conocer cómo encajan estos componentes.

Lista de comprobación rápida para la resolución de problemas con cargas líquidas

  • ¿Se ha completado el ciclo, pero los resultados presentan variaciones entre botellas? Verifique el tamaño de las botellas y la uniformidad del volumen de llenado.
  • ¿Se desborda el medio al extraer el recipiente? Verifique la presencia y el correcto funcionamiento del sistema de lastre de aire si se está empleando el enfriamiento rápido.
  • ¿Se sospecha que parte de la carga no se ha procesado lo suficiente? Compruebe la posición de la sonda de carga en relación con el recipiente más grande o que se calienta más lentamente.

Segunda parte: Ciclos de desecho y residuos

Las cargas de desecho y residuos se perciben con frecuencia como la categoría más sencilla del trabajo con el autoclave: el material que contienen se destruye, no se conserva, por lo que resulta tentador hacer funcionar el autoclave a la máxima potencia y dar por concluido el proceso. Eso funciona, pero rara vez es el método más eficiente, y «esta vez ha funcionado» es un listón muy bajo para un proceso cuyo único objetivo es hacer que el material contaminado sea seguro de manipular.

El verdadero reto con una carga de desechos es de carácter estructural más que químico: las bolsas, los guantes, los tubos y las placas de Petri crean una geometría compleja de formas entrelazadas que atrapan bolsas de aire, y ese aire atrapado bloquea el vapor del que depende la esterilización.

Elección y preparación de la bolsa

Comience por utilizar bolsas adecuadas compatibles con el autoclave. El instinto de sellar herméticamente una bolsa de residuos, como se haría con una bolsa de basura, juega en su contra en este caso: desde el punto de vista de la esterilización en autoclave, cuanto más abierta esté la bolsa, mejor. Deje la bolsa abierta o frunza ligeramente la parte superior y fíjela con cinta para autoclave de tal manera que aún pueda introducir los dedos en la abertura. Esto permite que el aire se escape y que el vapor entre libremente, en lugar de convertir la bolsa en una bolsa hermética con aire atrapado que actúa como aislante.

Contención del riesgo: el contenedor Morrison

Las bolsas de residuos deben introducirse en un contenedor Morrison o en una cesta rígida equivalente para autoclave, provista de una sección inferior impermeable y de una zona central perforada. Si una bolsa se rompe durante el ciclo —lo que puede ocurrir debido al plástico caliente y al desplazamiento de la carga—, el contenedor recogerá los derrames y evitará que el material contaminado alcance las estanterías, el suelo de la cámara o los elementos calefactores situados debajo. Las perforaciones permiten que el vapor alcance el fondo y el centro de la carga, en lugar de que el líquido se acumule sin dejar pasar el vapor.

Introduzca el contenedor cargado en la cámara dejando espacio a su alrededor para que el vapor circule libremente, y evite la tentación de introducir una bolsa más de las que el espacio permite cómodamente. El exceso de carga es una de las causas más comunes por las que un ciclo de esterilización no alcanza el rendimiento esperado: reduce la penetración del vapor y ralentiza la eliminación del aire en toda la carga, no solo en el elemento adicional.

Dónde no debe colocarse la sonda de carga

A diferencia de los ciclos de tratamiento de residuos, los ciclos de eliminación de residuos no suelen utilizar la sonda de carga dentro de los propios residuos. No introduzca la sonda en la bolsa: el plástico caliente puede derretirse a su alrededor, lo que dificultaría su extracción y podría dañar la sonda. En los ciclos de eliminación de residuos, la sonda suele colocarse de forma segura en el lateral del contenedor Morrison, y el controlador supervisa las condiciones de la cámara en lugar de intentar tomar una lectura representativa en el interior de una carga irregular e impredecible.

Qué ocurre durante un ciclo de eliminación de residuos

Los ciclos de eliminación de residuos suelen estar diseñados para artículos como placas de Petri, guantes, pañuelos de papel y residuos de laboratorio contaminados en general, y suelen realizarse a 121 °C durante al menos 15-20 minutos.

  1. Vaporización libre. El ciclo comienza en torno a los 95-100 °C, lo que permite que la temperatura de los residuos se equipare a la de la cámara y, lo que es fundamental, ayuda a eliminar el aire del interior de las bolsas y de alrededor de la carga.
  2. Mantenimiento de la esterilización. El autoclave eleva la temperatura de la cámara hasta unos 121 °C y la mantiene a ese nivel durante 15-20 minutos o más, dependiendo del protocolo y del tamaño de la carga; los residuos más densos o voluminosos pueden requerir un tiempo considerablemente mayor, y los tiempos de mantenimiento validados siempre deben prevalecer sobre estas cifras generales.
  3. Enfriamiento. Dado que el control se basa en la temperatura de la cámara y no en una sonda de carga, los ciclos de residuos suelen enfriarse más rápido que las cargas de medios: los ventiladores de enfriamiento suelen activarse antes, lo que permite que la cámara y su contenido alcancen una temperatura de apertura segura con mayor rapidez.

Donde las funciones avanzadas demuestran su utilidad

Los autoclaves equipados con un sistema de vacío pueden mejorar significativamente la eliminación de aire, especialmente en las cargas de residuos, utilizando vacío pulsado para expulsar el aire atrapado de forma más agresiva que con el vapor libre por sí solo. Esto cobra mayor importancia cuando los volúmenes de residuos son elevados o la geometría de la carga resulta especialmente complicada: un contenedor con una mezcla de plásticos y guantes se beneficia mucho más de la eliminación activa de aire que lo que lo haría jamás una carga de simple material de vidrio. Consulte la guía complementaria de Astell sobre el diagnóstico y la reducción del tiempo de ciclo de los autoclaves para conocer cómo encaja la eliminación de aire en el panorama general de la eficiencia del ciclo.

Consideraciones sobre separación y cumplimiento normativo

Mezclar líquidos embotellados en una bolsa de residuos desechables o intentar procesar residuos biopeligrosos en la misma carga que los residuos generales habituales contraviene los cuidadosos pasos de eliminación de aire descritos anteriormente y puede generar problemas de cumplimiento normativo ajenos al autoclave en sí. Cuando una carga contiene material de mayor riesgo, las opciones de cumplimiento de la categoría III (CAT III), como la filtración HEPA, se convierten en un requisito previo en lugar de un extra opcional, y deben reflejarse en las especificaciones del equipo, no eludirse en la fase de carga.

Lista de comprobación rápida para la resolución de problemas en la carga de residuos

  • ¿Las bolsas presentan un procesamiento incompleto en el centro de la carga? Verifique la sobrecarga y el sellado de las bolsas antes de concluir que el problema está en la duración del ciclo.
  • ¿La sonda está dañada o resulta difícil de retirar tras un ciclo? Confirme que se colocó junto al contenedor Morrison, y no dentro de la bolsa.
  • ¿Se han detectado roturas o fugas tras abrir la cámara? Confirme que se está utilizando un contenedor Morrison, y no una cesta abierta, en cada ciclo de descarte.
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