Pourquoi la stérilisation des milieux de culture et des liquides ne s’apparente pas à la stérilisation d’autres types de matériaux
Depuis plus de 140 ans, Astell aide les organisations à mettre en œuvre une stérilisation à la vapeur efficace. Au fil du temps, de nombreuses installations concrètes nous ont permis de constater que les charges liquides constituent l’une des sources les plus courantes de problèmes d’autoclave lorsque le cycle n’est pas adapté à la charge. Cet article rassemble les leçons pratiques tirées par des utilisateurs qui stérilisent quotidiennement des milieux de culture, des bouillons et des liquides en bouteille.
Pourquoi les liquides nécessitent-ils un cycle spécifique ?
La stérilisation des milieux de culture et des liquides est l’une des tâches les plus courantes d’un autoclave de laboratoire. C’est également l’une de celles où l’on risque le plus de commettre des erreurs si le cycle est traité comme s’il s’agissait d’un cycle pour instruments emballés ou pour charges poreuses.
Les liquides ne sont pas des articles emballés. Un cycle pour charges poreuses ou instruments emballés peut recourir au vide et à une évacuation rapide pour faire pénétrer la vapeur dans le tissu, puis le sécher. Si l’on applique ce principe aux bouteilles de bouillon, une chute soudaine de pression peut provoquer une ébullition violente du liquide, entraînant des débordements, des bris et la nécessité de nettoyer la chambre. Les cycles pour liquides nécessitent une évacuation lente et contrôlée afin que la pression diminue progressivement et que le liquide reste à sa place. Les bouchons doivent être lâches ou munis d’un évent, jamais complètement hermétiques.
Mesurez la charge, pas seulement la chambre
La chambre peut atteindre 121 °C alors que le centre d’une grande bouteille n’a pas encore atteint cette température. C’est pourquoi la temporisation en fonction de la charge est si utile pour les liquides. Une sonde flexible placée dans un récipient de référence permet de ne déclencher la phase de maintien de stérilisation qu’une fois que le liquide lui-même a atteint la température requise.
C’est également la raison pour laquelle les utilisateurs prudents définissent leurs charges minimales et maximales. Une petite charge de liquide et une chambre pleine de grandes bouteilles peuvent toutes deux être valables, mais c’est le cas qui chauffe le plus lentement qui doit faire l’objet d’une validation.
C’est lors du refroidissement que le débit se gagne ou se perd
Après la phase de maintien, les bouteilles doivent refroidir en toute sécurité avant l’ouverture de la porte. Le refroidissement va des simples systèmes de ventilation qui soufflent sur les faces externes de la chambre de l’autoclave, aux chemises de refroidissement qui font circuler de l’eau autour de la chambre pour évacuer sa chaleur, tandis que des ventilateurs à l’intérieur de la chambre refroidissent la charge en soufflant de l’air frais sur celle-ci.
La pression de soutien fournie par les systèmes de lestage à air aide à maintenir les bouteilles ensemble pendant leur refroidissement, afin que les bouchons ne se soulèvent pas et que le verre ne se brise pas.
Le choix du système de refroidissement approprié dépend de la charge, du conteneur et du rythme de travail du laboratoire. Une équipe effectuant plusieurs cycles de traitement de liquides par jour a des besoins différents de ceux d’un laboratoire ne traitant qu’occasionnellement une charge de bouteilles.
Évitez le surtraitement
Une chaleur plus intense n’est pas toujours préférable. Un traitement excessif de la gélose peut caraméliser les sucres et modifier le pH ; l’objectif est donc d’atteindre une létalité suffisante, sans aller au-delà. Le cas échéant, la létalité cumulée, ou F0, permet de comparer les cycles en fonction de l’effet biologique obtenu plutôt qu’en se basant uniquement sur la durée. Pour les milieux véritablement sensibles à la chaleur, de nombreux laboratoires programment un cycle à température plus basse — environ 115 °C — parallèlement au cycle standard à 121 °C, et y ont recours lorsque le milieu ne survivrait pas à un cycle plus chaud.
Le récipient le plus couramment utilisé pour ce travail est la bouteille Duran — les modèles de 500 ml et de 1 litre sont les outils de travail quotidiens, souvent remplis partiellement de milieu ou d’eau. Un cycle typique pour les liquides peut consister à traiter des milieux préparés dans des bouteilles Duran ventilées à 121 °C pendant 15 minutes, en utilisant une évacuation lente et une sonde de charge de référence pour confirmer que le liquide lui-même atteint la température requise.
Ce que cela implique pour les charges liquides
Adaptez le cycle, le mode de chargement et la méthode de refroidissement aux flacons réellement utilisés. En procédant ainsi, le laboratoire obtiendra des milieux de culture fiables, réduira les incidents évitables et disposera d’un autoclave plus à même de suivre le rythme de la journée de travail.
Comment Astell peut vous aider
Astell aide les utilisateurs à configurer des cycles pour liquides en fonction des flacons réels, des volumes de remplissage, des fermetures, des besoins de refroidissement et des exigences de validation du laboratoire. Si vous souhaitez valider l’efficacité de votre cycle de stérilisation des liquides ou si vous avez d’autres questions relatives aux autoclaves, contactez Astell pour en discuter. Avec des centaines d’autoclaves disponibles, des configurations hautement personnalisables, des options d’installation polyvalentes et une équipe d’experts composée d’ingénieurs de service internes, Astell possède les compétences et l’expérience nécessaires pour vous aider à relever vos défis en matière de stérilisation à la vapeur. Contactez Astell dès aujourd’hui à l’adresse Info@Astell.com.
