A porta da câmara é aberta e cestas com os artigos a esterilizar são introduzidas na câmara.

A autoclave é ativada por meio do computador de controle, que automatiza e controla o processo de esterilização. Primeiramente, ela abre uma válvula, permitindo que a água flua para dentro da câmara sob a força da gravidade. Assim que a câmara tiver água suficiente, a válvula é fechada.

A autoclave liga o aquecedor, elevando a temperatura da água e gerando vapor. A válvula de exaustão é aberta, permitindo que o vapor expulse o ar da câmara e o conduza para fora, passando pelo reservatório Ecofill.

Assim que todo o ar tiver sido expulso da câmara, a válvula de exaustão é fechada. À medida que mais vapor é gerado, ele não tem para onde ir, fazendo com que a pressão na câmara aumente. A pressão crescente do vapor exerce força sobre a água, exigindo mais energia térmica para que as moléculas de água escapem e se transformem em vapor. À medida que a água continua a ser aquecida, o vapor é produzido a temperaturas acima de 100 °C. Quando atinge temperaturas acima de 121 °C, os itens na câmara começam a ser esterilizados. A 121 °C, são necessários no mínimo 30 minutos para a esterilização. Em temperaturas mais altas, a esterilização ocorre mais rapidamente.

Assim que a esterilização estiver concluída, uma válvula é aberta, e a pressão produzida pelo vapor na câmara força a água a sair da câmara e retornar ao reservatório Ecofill. A água na câmara está agora quente e irá reter esse calor para auxiliar em um processo de esterilização subsequente. Isso ajuda a remover o calor da câmara, permitindo que ela esfrie mais rapidamente.

O vapor pressurizado é liberado pela exaustão através do reservatório Ecofill, capturando água e calor.

A câmara e seu conteúdo esfriam. À medida que isso ocorre, a pressão na câmara cai até se equiparar à do ambiente externo. Quando a pressão estiver equalizada, a porta da câmara poderá ser aberta, e os itens, agora esterilizados, poderão ser removidos.