Kammardörren öppnas och korgar fyllda med föremål som ska steriliseras lastas in i kammaren.

Autoklaven aktiveras via styrdatorn, som automatiserar och styr steriliseringsprocessen. Först öppnas en ventil som låter vatten strömma in i kammaren med hjälp av tyngdkraften. När kammaren har tillräckligt med vatten stängs ventilen.

Autoklaven aktiverar värmaren, som värmer upp vattnet och genererar ånga. Avtappningsventilen öppnas, och ångan pressar ut luften ur kammaren och ut genom avtappningen via Ecofill-reservoaren.

När all luft har pressats ut ur kammaren stängs avgasventilen. Eftersom mer ånga alstras har den ingenstans att ta vägen, vilket gör att trycket i kammaren stiger. Det ökande ångtrycket trycker nedåt på vattnet, vilket kräver mer värmeenergi för att vattenmolekylerna ska kunna frigöras och omvandlas till ånga. Allteftersom vattnet fortsätter att värmas upp alstras ånga vid temperaturer över 100 °C. När temperaturen överstiger 121 °C inleds steriliseringen av föremålen i kammaren. Vid 121 °C krävs minst 30 minuter för steriliseringen. Vid högre temperaturer sker steriliseringen snabbare.

När steriliseringen är klar öppnas en ventil, och trycket som ångan i kammaren alstrar pressar ut vattnet ur kammaren och tillbaka till Ecofill-behållaren. Vattnet i kammaren är nu varmt och kommer att behålla den värmen för att underlätta en efterföljande steriliseringsprocess. Detta bidrar till att leda bort värme från kammaren, vilket gör att den kyls ner snabbare.

Trycksatt ånga släpps ut från avgasröret via Ecofill-reservoaren, vilket fångar upp vatten och värme.

Kammaren och dess innehåll kyls ned. När detta sker sjunker trycket i kammaren till samma nivå som den yttre miljön. När trycket har utjämnats kan kammarens lucka öppnas och de nu sterila föremålen tas ut.