Kammion ovi avataan, ja steriloitavat esineet asetetaan kammion sisään. Tässä esimerkissä steriloitavat esineet ovat Morrison-jätesäiliöissä. Kun höyrygeneraattorin vesimäärä on vähissä, se täyttyy automaattisesti.

Tyhjiöpumppu poistaa ilmaa kammiosta, jolloin kammion sisällä muodostuu alipaine ja osa steriloitavien esineiden sisään jääneestä ilmasta poistuu.

Venttiili avautuu, ja höyrygeneraattorista tuleva höyry täyttää kammion, mikä nostaa kammion sisäistä painetta ja irrottaa lisää kammion esineiden sisään jäänyttä ilmaa.

Kammion paine käy läpi toistuvia syklejä, joissa kammio paineistetaan höyryllä ja sen jälkeen paine poistetaan tyhjiöllä. Tämä puristaa ja laajentaa kammioon jäänyttä ilmaa, jolloin se irtoaa taskusta, kunnes kaikki ilma on korvattu höyryllä.

Höyrygeneraattori jatkaa toimintaansa ja lisää höyryä autoklaaviin. Kun höyryä lisätään, paine ja lämpötila nousevat. Kun kammion lämpötila saavuttaa 121 °C tai enemmän, kuorman sterilointi alkaa. Lämpötilaa pidetään yllä ennalta määritetyn ajan, jotta täydellinen sterilointi varmistetaan.

Kun sterilointi on päättynyt, höyrygeneraattoriin johtava venttiili suljetaan ja kammio jäähtyy. Lämpötilan ja paineen laskiessa höyry tiivistyy vedeksi, joka kerääntyy kammion pohjalle. Kun paine tasaantuu, venttiili tyhjentää veden ja kammion luukku voidaan avata turvallisesti.