Дверцята камери відкриваються, і предмети, що підлягають стерилізації, поміщаються всередину камери. У цьому прикладі предмети, що підлягають стерилізації, знаходяться у контейнерах для відходів Morrison. Коли в парогенераторі залишається мало води, він автоматично поповнює її.

Вакуумний насос видаляє повітря з камери, створюючи знижений тиск та витісняючи залишки повітря з предметів, призначених для стерилізації.

Відкривається клапан, і пара з парогенератора заповнює камеру, підвищуючи тиск усередині камери та витісняючи ще більше повітря, що затрималося в предметах у камері.

Тиск у камері проходить через повторювані цикли нагнітання пари, а потім зниження тиску за допомогою вакууму. Це стискає та розширює повітря, що застрягло в камері, витісняючи його з порожнин, доки все повітря не буде замінено парою.

Парогенератор продовжує працювати, подаючи більше пари в камеру автоклава. У міру подачі пари тиск і температура підвищуються. Як тільки температура в камері досягає 121 °C або вище, починається стерилізація завантаження. Температура підтримується протягом заздалегідь визначеного періоду для забезпечення повної стерилізації.

Після завершення стерилізації клапан, що веде до парогенератора, закривається, і камера охолоджується. У міру зниження температури та тиску пара конденсується у воду, яка збирається на дні камери. Коли тиск вирівнюється, клапан зливає воду, і дверцята камери можна безпечно відкрити.